A cost-effective melting temperature assay for the detection of single-nucleotide polymorphism in the MBL2 gene of HIV-1-infected children

We report a fast (less than 3 h) and cost-effective melting temperature assay method for the detection of single-nucleotide polymorphisms in the MBL2 gene. The protocol, which is based on the Corbett Rotor Gene real time PCR platform and SYBR Green I chemistry, yielded, in the cohorts studied, sensitive (100 percent) and specific (100 percent) PCR amplification without the use of costly fluorophore-labeled probes or post-PCR manipulation. At the end of the PCR, the dissociation protocol included a slow heating from 60° to 95°C in 0.2°C steps, with an 8-s interval between steps. Melting curve profiles were obtained using the dissociation software of the Rotor Gene-3000 apparatus. Samples were analyzed in duplicate and in different PCR runs to test the reproducibility of this technique. No supplementary data handling is required to determine the MBL2 genotype. MBL2 genotyping performed on a cohort of 164 HIV-1-positive Brazilian children and 150 healthy controls, matched for age and sex and ethnic origin, yielded reproducible results confirmed by direct sequencing of the amplicon performed in blind. The three MBL2 variants (Arg52Cys, Gly54Asp, Gly57Glu) were grouped together and called allele 0, while the combination of three wild-type alleles was called allele A. The frequency of the A/A homozygotes was significantly higher among healthy controls (0.68) than in HIV-infected children (0.55; P = 0.0234) and the frequency of MBL2 0/0 homozygotes was higher among HIV-1-infected children than healthy controls (P = 0.0296). The 0 allele was significantly more frequent among the 164 HIV-1-infected children (0.29) than among the 150 healthy controls (0.18; P = 0.0032). Our data confirm the association between the presence of the mutated MBL2 allele (allele 0) and HIV-1 infection in perinatally exposed children. Our results are in agreement with the literature data which indicate that the presence of the allele 0 confers a relative risk of 1.37 for HIV-1 infection through vertical transmission.

Estudos dos fatores de risco pré-operatórios para bacteriobilia em doentes portadores de colecistite aguda calculosa / Study of preoperative risk factors for bactibilia in patients with calculosis acute cholecystitis

OBJETIVO: Determinar uma associaçäo entre o quadro clínico pré-operatório e os resultados das culturas de bile e da parece vesicular. CASUISTICA E METODOS: Foram estudadas 28 variáveis considerando-se história clínica, exame físico e investigaçäo laboratorial em 38 doentes portadores de colecistite aguda calculosa, submetidos à cirurgia de urgência. Este estudo prospectivo foi realizado em 19 meses, entre novembro de 1995 a maio de 1997. Foram realizadas culturas para agentes anaeróbios e aeróbios, em três diferentes meios de cultura (BACTEC 9240, BHI e HEMOBAC). RESULTADOS: Foram isoladas bactérias em pelo menos um meio de cultura em 68,2 por cento dos doentes. Pela anßlise univariada, foram identificadas cinco variáveis pré-operatórias como preditivas de bacteriobilia: idade acima de 55 anos, temperatura diferencial axilo-retal maior do que 0,4 C, leucocitose acima de 12000 cels/mmÝ, neutrofilia acima de 75 por cento e neutrófilos bastonetes acima de 4 por cento. Devido ao pequeno tamanho da amostra, näo pôde ser observada significância estatística por regressäo logística, embora pudesse ser observada em 98 por cento uma tendência para determinaçäo pré-operatória dos indivíduos com cultura positiva por meio do modelo baseado na idade e porcentagem de neutrófilos bastonetes. Pela análise em conjunto dos fatores preditivos, pôde-se observar que doentes com mais de um fator preditivo têm uma possibilidade significantemente maior para cultura positiva, quando comparado com aqueles com fator preditivo de bacteriobilia. CONCLUSAO: Conclui-se, portanto, que pela utilizaçäo de dados facilmente disponíveis em doentes com colecistite aguda calculosa, a bacteriobilia pode ser previsível no pré-operatório,

Reference values for lung function tests: I. Static volumes

Static lung volume (LV) measurements have a number of clinical and research applications; however, no previous studies have provided reference values for such tests using a healthy sample of the adult Brazilian population. With this as our main purpose, we prospectively evaluated 100 non-smoking subjects (50 males and 50 females), 20 to 80 years old, randomly selected from more than 8,000 individuals. Gender-specific linear prediction equations were developed by multiple regression analysis with total lung capacity (TLC), functional residual capacity (FRC), residual volume (RV), RV/TLC ratio and inspiratory capacity (IC) as dependent variables, and with age, height, weight, lean body mass and indexes of physical fitness as independent ones. Simpler demographic and anthropometric variables were as useful as more complex measurements in predicting LV values, independent of gender and age (R2 values ranging from 0.49 to 0.78, P<0.001). Interestingly, prediction equations from North American and European studies overestimated the LV at low volumes and underestimated them at high volumes (P<0.05). Our results, therefore, provide a more appropriate frame of reference to evaluate the normalcy of static lung volume values in Brazilian males and females aged 20 to 80 years.

Deteccion de antigeno del polisacarido capsular de Cryptococcus neoformans en pacientes con SIDA y neurocriptococosis en Sao Paulo, Brasil / Detection of capsular polysaccharide antigen of Cryptococcus neoformans in patients with AIDS and neurocryptococcosis in Sao Paulo, Brazil

Antigeno del polisacarido capsular (AgPC) de Cryptococcus neoformans fue detectado por la tecnica de aglutinacion de latex (AL) en LCR y suero de pacientes con Sindrome de Inmunodeficiencia Adquirida (SIDA) y primer episodio de neurocriptococosis, usando como patron el examen micologico (examen directo y cultivo) de LCR. Se obtuvo una sensibilidad de 100 por ciento de AL para detectar AgPC de C. neoformans, el cual por su rapidez permite tratamiento especifico precoz. Titulos iniciales de AgPC de la levadura en esos pacientes pueden ser>1.000.000, pareciendo que cuando esos titulos estan presentes en suero, se relacionan con mortalidad durante el tratamiento. En los pacientes que sobrevivieron se observo que el examen micologico directo y AgPC de C. neoformans, en LCR y suero, permanecen positivos aun despues de tratamiento y mejoria clinica del paciente.

A interpretacao de testes diagnosticos. / The interpretation of diagnostic tests

Numero consideravel de publicacoes sobre interpretacao de testes diagnosticos tem sido publicado nos ultimos anos. O leitor medico e facilmente afogado por graficos, tabelas, curvas, formulas e jargao tecnico Neste artigo, os autores enfocam o tema, apresentando estrategias e taticas para interpretacao de testes diagnosticos, apresentados de maneira didatica e de facil manuseio pelo clinico. Apesar de a maioria das explicacoes de como interpretar um teste diagnostico usar exemplos de resultados de laboratorio, os mesmos principios aplicam-se igualmente para achados de historia ou exame fisico. Os autores pretendem, atraves da discussao de um teste diagnostico - dosagem de CPK para diagnostico de infarto do miocardio - apresentar uma sistematica para interpretacao de um teste diagnostico em geral, usando o minimo possivel de conceitos matematicos e utilizando sempre exemplos de situacoes clinicas rotineiras

Criterios metodologicos para escolha de procedimentos terapeuticos. / Methodological criteria for the choise of therapeutic procedures

Com certo atraso com relacao as ciencias sociais, a literatura medica da ultima decada foi marcada por relevante melhora no padrao metodologico de seus artigos. Consequentemente, a discussao de achados de pesquisas na area de saude incorporou todo um jargao metodologico ate entao muito pouco conhecido pelo profissional de saude. A interpretacao dos resultados de uma investigacao cientifica passa necessariamente pelo crivo de cuidadosa analise metodoligica. Ou seja, antes de aceitar as conclusoes a que chegou o investigador, o leitor medico passa a se questionar quanto a qualidade metodologica empregada na investigacao. Nesse artigo os autores discutem, de maneira didatica, criterios falcilmente manuseaveis pelo clinico, para avaliacao da qualidade da informacao sobre procedimentos terapeutios em geral. Em outros artigos, discutiremos criterios na determinacao da qualidade da informacao sobre testes diagnosticos, prognosticos e associacoes casuais/

Tratamento quimioterapico antituberculose. Eficaz ou efetivo? / Chemotherapeutic treatment for tuberculosis.

Apesar de consideraveis progressos na luta contra a tuberculose pulmonar, esta doenca e ainda responsavel por grande morbilidade mortalidade e incapacitacao na maioria dos paises subdesenvolvidos. O risco da infeccao tuberculosa tem sido dramaticamente reduzido nos paises desenvolvidos, enquanto que este risco continua praticamente o mesmo no mundo subdesenvolvido.Nos anos 60 era cada vez mais evidente, para alguns investidores, que o tratamento de longa duracao, apesar de eficaz, estava muito alem dos recursos disponiveis a quase todos paises pobres. Alem disso, quando administrados rotineiramente em dispensarios, os assim chamados esquemas 100% eficazes cairam para niveis da ordem de somente 50% de sucesso. Era entao necessario pesquisar-se esquemas mais efetivos, baratos e menos toxicos, para que o tratamento antituberculose ficasse ao alcance dos paises em desenvolvimento. A quimioterapia de curta duracao e uma tentativa de melhorar a efetividade do tratamento de tuberculose pulmonar. Nesse artigo, os principais estudos clinicos randomizados e controlados para avaliar a eficacia de esquemas de curta duracao sao revistos. Alguns aspectos metodologicos sao salientados e validade das conclusoes discutida. Em seguida abordam-se especialmente os ensaios clinicos avaliando esquemas intermitentes. Finalmente, as bases bacteriologicas da quimioterapia de curta duracao tuberculose sao apresentadas